LUYOR-3415RG照不出熒光的原因

作者：上海路陽時(shí)間：2021-03-18 21:29:01瀏覽1971 次

信息摘要：

為什么按照LUYOR-3415說明書操作卻看不到熒光的表達(dá)：原因是光源沒有選擇正確，比如載體標(biāo)注的熒光蛋白應(yīng)該在488nm下激發(fā)出熒光，但是卻選擇了540nm或者365nm的光源去激發(fā)熒光蛋白，這種情況是看不到熒光蛋白的。可以根據(jù)產(chǎn)品介紹或者聯(lián)系客服小姐姐進(jìn)行咨詢再選擇。<

1.為什么熒光顯微鏡能觀察到熒光，用LUYOR-3415RG觀測看不到？

因?yàn)橛行┲踩氲?strong>熒光蛋白不是整體表達(dá)，只是局部表達(dá)，表達(dá)的面積太小，人的肉眼無法識別，而熒光顯微鏡是在放大幾十倍甚至上百倍觀察的效果。

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2.為什么按照LUYOR-3415說明書操作卻看不到熒光的表達(dá)

原因是GFP激發(fā)光源沒有選擇正確，比如載體標(biāo)注的熒光蛋白應(yīng)該在488nm下激發(fā)出熒光，但是卻選擇了540nm或者365nm的激發(fā)光源去激發(fā)熒光蛋白，這種情況是看不到熒光蛋白的。可以根據(jù)LUYOR-3415 GFP激發(fā)光源介紹或者聯(lián)系客服小姐姐進(jìn)行咨詢再選擇。

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3.為什么波段選擇是正確的還看不到熒光表達(dá)？

除了表達(dá)量少以外，很有可能是實(shí)驗(yàn)的操作失誤，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，因此看不到熒光，可以選擇其他的陽性質(zhì)粒進(jìn)行檢測儀器效果。

4.為什么說載體表達(dá)量低會導(dǎo)致看不到熒光蛋白？是不是表達(dá)量低的熒光蛋白都會看不見熒光？

大家都知道肉眼的可視范圍是有限的，比如只能看見籃球大小的物體，這時(shí)我們的載體表達(dá)量只有乒乓球大小就會導(dǎo)致看不見。并不是的表達(dá)量低都看不見熒光表達(dá)，只有低于人眼可視范圍的表達(dá)量才會導(dǎo)致看不見熒光的表達(dá)。這時(shí)可以借助普通的顯微鏡加上LUYOR-3415組合成熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。

5.LUYOR-3415RG如何切換光源？

切換光源可在儀器頭部后方圓形按鈕處，輕輕按下按鈕即可輕松切換光源

6.植入到葉片的熒光蛋白為什么無法觀察到？

因剛剛植入進(jìn)去不久，表達(dá)位置太小，肉眼無法識別。特別是在組培繁殖研究經(jīng)常遇到此問題。

7.用LUYOR-3415熒光蛋白觀測鏡無法分選含有GFP的種子

因?yàn)橐话惴N子表皮都有堅(jiān)硬的外殼，很多種子外殼上沒有表達(dá)GFP，隔著外殼很難去分選種子。

8.為什么老鼠早期可以看到熒光蛋白后期就很難看得到？

剛出生的轉(zhuǎn)基因老鼠皮膚比較薄，毛發(fā)少，很容易觀察到GFP,在生長一段時(shí)間在表皮就很難看得到。

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9.觀察到的GFP效果如何拍照？

如果用單反相機(jī)拍照，請購買專用的拍照濾鏡，把相機(jī)調(diào)試到合適的拍照模式（不同品牌的相機(jī)拍照模式不一樣），我公司提供62mm的單反相機(jī)專用拍照濾鏡，可以單獨(dú)購買。

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10.購買的62mm相機(jī)濾鏡和照相機(jī)不配套怎么辦？

請先識別自己相機(jī)鏡頭尺寸，正視相機(jī)前端，上面一般會標(biāo)識XXmm，例如：58mm，67mm等，如果是58mm的鏡頭，請購買62轉(zhuǎn)58mm的轉(zhuǎn)換卡，通過轉(zhuǎn)換卡可以將62mm的濾鏡安裝到58mm鏡頭上。我公司提供部分常規(guī)尺寸的轉(zhuǎn)換卡，常規(guī)的轉(zhuǎn)換卡也可以向我公司技術(shù)人員免費(fèi)索取。

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